細胞實(shí)驗外包 檢測服務(wù)

一、細胞培養

1取材 在無(wú)菌環(huán)境下從機體取出某種組織細胞（視實(shí)驗目的而定），經(jīng)過(guò)的處理（如消化分散細胞、分離等）后接入培養器血中，這一過(guò)程稱(chēng)為取材。如是細胞株的擴大培養則無(wú)取材這一過(guò)程。機體取出的組織細胞的次培養稱(chēng)為原代培養。2培養 將取得的組織細胞接入培養瓶或培養板中的過(guò)程稱(chēng)為培養。3凍存及復蘇（可參閱后面有關(guān)章節）為了保存細胞，特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株，要將細胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度－196℃，將細胞收集至凍存管中加入含保護劑（一般為二甲亞砜或甘油）的培養基，以的冷卻速度凍存，終保存于液氮中。在極低的溫度下，細胞保存的時(shí)間是無(wú)限的。復蘇一般采用快融方法，即從液氮中取出凍存管后，立即放入37℃水中，使之在一分鐘內迅速融解。然后將細胞轉入培養器皿中進(jìn)行培養。

二、原代細胞分離

凡是來(lái)源于胚胎、組織器官及外周血，經(jīng)特殊分離方法制備而來(lái)的原初培養的細胞稱(chēng)之為原代細胞。1懸浮細胞的分離方法組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡(jiǎn)單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。2實(shí)體組織材料的分離方法對于實(shí)體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。

三、細胞增殖檢測技術(shù)

目前主要有兩種用于檢測細胞增殖能力的方法。一種是直接的方法，通過(guò)直接測定進(jìn)行分裂

的細胞數來(lái)評價(jià)細胞的增殖能力。另一種是間接的方法，即細胞活力（cell viability）檢測方法，通過(guò)檢測樣品中健康細胞的數目來(lái)評價(jià)細胞的增殖能力。顯然，細胞活力檢測法并不能終證明檢測樣品中的細胞是否在增殖。如細胞在某一培養條件下會(huì )自發(fā)啟動(dòng)凋亡程序，但**的干擾可抑制凋亡的發(fā)生；這時(shí)若采用細胞活力檢測法，顯然可以區分兩種條件下的細胞數量，但我們并不能從**干擾組細胞數大于對照組的事實(shí)說(shuō)明**可促進(jìn)細胞增殖的結論。所以直接的證據應該采用方法一。

其中常見(jiàn)檢測：CCK8檢測法 ，MTT檢測法，Brdu檢測法，Edu檢測法，平板克隆形成。

四、細胞周期檢測技術(shù)

細胞周期指由細胞分裂結束到下一次細胞分裂結束所經(jīng)歷的過(guò)程，所需的時(shí)間叫細胞周期時(shí)間。

常用的方法：流式檢測細胞周期，標記有絲分裂百分率法。

五、細胞凋亡檢測

常見(jiàn)檢測方法：流式檢測細胞凋亡，線(xiàn)粒體膜電位，活性氧檢測，Hoechst染色，電鏡，TUNEL。

六、細胞轉移能力檢測

常見(jiàn)檢測方法：細胞劃痕實(shí)驗，Transwell實(shí)驗，Invasion實(shí)驗

七、其他實(shí)驗

細胞惡性程度：軟瓊脂實(shí)驗

細胞屏障：跨膜電阻、熒光黃透過(guò)率

細胞粘附實(shí)驗

共培養實(shí)驗

裸鼠成瘤實(shí)驗