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    甲基化檢測(BSP)

    甲基化檢測(BSP)

    簡(jiǎn)要描述:
    甲基化檢測 BSP:用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA,則未發(fā)生甲基化的胞嘧啶被轉化為尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不變。隨后設計BSP引物進(jìn)行PCR,在擴增過(guò)程中尿嘧啶全部轉化為胸腺嘧啶,然后對PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序就可以判斷CpG位點(diǎn)是否發(fā)生甲基化稱(chēng)為BSP-直接測序方法。

    更新時(shí)間:2023-10-30

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    廠(chǎng)商性質(zhì):其他

    甲基化檢測BSP/MSP法
    DNA甲基化是表觀(guān)遺傳學(xué)的重要研究?jì)热葜?,它可以抑制基困的表達。甲基化通常發(fā)生在胞嘧啶的C5位,形成5-甲基胞嘧啶(5mC),甲基化的胞密啶多位于CpG島上。DNA甲基化在人的正常發(fā)育、X染色體失活、衰老以及許多人類(lèi)疾病(如發(fā)育畸形、癌癥、心血管疾病、糖尿病和神經(jīng)心理失調等)過(guò)程中發(fā)揮重要作用,已經(jīng)成為表觀(guān)遺傳學(xué)和表觀(guān)基因組學(xué)的重要研究?jì)热?。該方法為甲基化檢測的金標準,可定量檢測基因甲基化水平?;蚪MDNA經(jīng)亞硫酸氫鹽處理后,設計BSP引物擴增目的片段,然后對PCR產(chǎn)物進(jìn)行克隆并選取10個(gè)轉化子序列,即可確定所研究的CpG區域的甲基化頻率。目前,基因的甲基化研究主要結合亞硫酸氫鈉處理和PCR技術(shù),分為甲基化特異性PCR和硫化測序PCR。

    甲基化檢測BSP:甲基化的胞嘧啶在亞硫酸氫鈉發(fā)生脫氨基后不會(huì )轉變,用一對持異性引物擴增后測序,再與DNA原始序列比對確定甲基化位點(diǎn)。測序法克服了只能針對單個(gè)位點(diǎn)檢測,并且這些位點(diǎn)必須是限制性?xún)惹忻缸R別位點(diǎn)的缺點(diǎn),可以對任何基因序列的甲基化狀態(tài)進(jìn)行檢測。

    實(shí)驗服務(wù):包含DNA抽提,引物設計合成,亞硫酸鹽處理,反應。每個(gè)反應可以檢測50bp左右,可以目的區域。

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