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熒光素酶檢測
簡(jiǎn)要描述：
熒光素酶檢測技術(shù)：通過(guò)miRNA靶標的鑒定，從而進(jìn)行miRNA功能的深入研究。
更新時(shí)間：2023-10-30
訪(fǎng)問(wèn)量：792
廠(chǎng)商性質(zhì)：其他
熒光素酶檢測實(shí)驗原理
miRNA通過(guò)堿基配對結合到靶mRNA的3'UTR區,抑制靶基因的翻譯或對靶基因mRNA的降解達到調控基因表達的目的。將靶mRNA的3'UTR區構建至螢火蟲(chóng)熒光素酶報告基因的3'端，與miRNA表達載體及海腎熒光素酶報告基因載體并轉染細胞，先后加入兩種底物熒光素，通過(guò)對熒光素酶報告基因的表達檢測確認miRNA對靶基因的調控效果。
熒光素酶檢測技術(shù)應用：通過(guò)miRNA靶標的鑒定，從而進(jìn)行miRNA功能的深入研究。
| 實(shí)驗問(wèn)題 | 原因 | 推薦解決方法 |
| 發(fā)光檢測值過(guò)低 | 熒光素酶表達過(guò)低 | 注意調整細胞狀態(tài)、轉染條件、轉染量，提高發(fā)光值 |
| 檢測試劑 | 避免反復凍融以及保存時(shí)間過(guò)長(cháng) | |
| 發(fā)光檢測值過(guò)高 | 熒光素酶表達過(guò)高 | 建議通過(guò)降低轉染量或減少檢測體積等降低發(fā)光 |
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