掃描電鏡檢測

一、掃描電鏡檢測實(shí)驗原理

   主要是通過(guò)發(fā)射電子聚焦光束來(lái)掃描樣品的表面形態(tài).電子束與樣品表面的樣子發(fā)生作用,產(chǎn)生多種能夠被檢測的信號,這些信號就包含了樣品的表面形態(tài)和組成.染色。

二、掃描電鏡檢測實(shí)驗流程

1. 樣品的初步處理

a.取材樣品面積可達8mm×8mm，厚度可達5mm。對于易卷曲的樣品如血管、胃腸道粘膜等，可固定在濾紙或卡片紙上，以充分暴露待觀(guān)察的組織表面。

b.樣品的清洗

(1)用等滲的生理鹽水或緩沖液清洗；

(2)用5%的蘇打水清洗；

(3)用超聲震蕩或酶消化的方法進(jìn)行處理。

c. 固定

固定所用的試劑和透射電鏡樣品制備相同，常用戊二醛及鋨酸雙固定。由于樣品體積較大，固定時(shí)間應適當延長(cháng)。也可用快速冷凍固定。

d. 脫水

樣品經(jīng)漂洗后用逐級增高濃度的酒精或丙酮脫水，然后進(jìn)入中間液，一般用醋酸異戊酯作中間液。

2. 樣品的干燥

a.空氣干燥法

空氣干燥法又稱(chēng)自然干燥法，就是將經(jīng)過(guò)脫水的樣品，讓其暴露在空氣中使脫水劑逐漸揮發(fā)干燥。這種方法的大優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)便易行和節省時(shí)間；它的主要缺點(diǎn)是在干燥過(guò)程中，組織會(huì )由于脫水劑揮發(fā)時(shí)表面張力的作用而產(chǎn)生收縮變形。因此，該方法一般只適用于表面較為堅硬的樣品。

b. 冷凍干燥法

(1)置于冷凍保護劑中：將樣品置于冷凍保護劑中浸泡數小時(shí)。常用的冷凍保護劑為10%～20%二甲基亞砜水溶液，或15%～40%甘油水溶液。

(2)驟冷：將經(jīng)過(guò)保護劑處理的樣品迅速投入用液氮預冷至(150℃的氟利昂冷凍劑中，使樣品中的水分很快凍結。

(3)干燥：將已凍結的樣品移到冷凍干燥器內已預冷的樣品臺上，抽真空，經(jīng)幾小時(shí)或數天后，樣品即達到干燥。本方法不需要脫水，避免了有機溶劑對樣品成分的抽提作用，不會(huì )使樣品收縮，也是較早使用的方法。但是，由于花費時(shí)間長(cháng)，消耗液氮多，容易產(chǎn)生冰晶損傷，因此未被廣泛應用。

3. 樣品的導電處理(真空鍍膜法)

       真空鍍膜法是利用真空膜儀進(jìn)行的。其原理是在高真空狀態(tài)下把所要噴鍍的金屬加熱，當加熱到熔點(diǎn)以上時(shí)，會(huì )蒸發(fā)成極細小的顆粒噴射到樣品上，在樣品表面形成一層金屬膜，使樣品導電。噴鍍用的金屬材料應選擇熔點(diǎn)低、化學(xué)性能穩定、在高溫下和鎢不起作用以及有高的二次電子產(chǎn)生率、膜本身沒(méi)有結構?，F在一般選用金或金和碳。為了獲得細的顆粒，有用鉑或用金-鈀、鉑-鈀合金的。金屬膜的厚度一般為10 nm～20 nm。真空鍍膜法所形成的膜，金屬顆粒較粗，膜不夠均勻，操作較復雜并且費時(shí)，目前已經(jīng)較少使用。4. 拍攝

三、客戶(hù)提供

組織、細胞

四、公司提供

基本實(shí)驗步驟、藥品、樣品處理、圖片及圖片分析

實(shí)驗周期：3-4周

伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗，具備完善的系統化管理能力和科研服務(wù)體系。目前已自建細胞、分子、病理等實(shí)驗平臺近1000平方米，擁有的儀器設備、細胞庫、樣本保存庫等。動(dòng)物實(shí)驗中心近1800平方米，可滿(mǎn)足同時(shí)飼養清潔級和SPF級動(dòng)物。核心實(shí)驗技術(shù)團隊主要來(lái)自中國科學(xué)院大學(xué)、復旦大學(xué)、上海交通大學(xué)等重點(diǎn)高校及科研機構，能夠為客戶(hù)提供研究方案策劃、項目實(shí)施及項目深度分析等方面的技術(shù)支持。公司目前參與研究項目已經(jīng)涵蓋心腦血管、腫瘤、內分泌、生殖、免疫、神經(jīng)等諸多領(lǐng)域。